抽象的
通过向母亲施用抗D可以有效地防止胎儿和新生儿的溶血性疾病。施用的IgG导致RBC特异性AB产生的衰减，该过程称为AB介导的免疫抑制（AMI）。由于在AMI的动物模型中没有对T细胞引发的重大影响发生，我们假设IgG在AMI条件下对免疫系统的影响可能涉及B细胞引发的缺陷。因此，我们用未处理的RBC或IgG-OPSON化的RBC（AMIS）挑战小鼠并评估B细胞灌注。从与未处理的RBcs转染的小鼠的B细胞，但不是由在Amis条件下处理的小鼠，如通过它们用作适当的T细胞的特异性APC的能力评估。据我们所知，这是第一份报告，证明AMIS抑制了Ag-Primed RBC特异性B细胞的外观。
防止胎儿溶血性疾病的常规施用和新生儿对恒生儿童怀孕的恒河D阴性母亲是人类疾病的基于AB的免疫疗法最强大的应用之一（1）。 IgG对受体中AB反应的抑制作用已被称为AB介导的免疫抑制（AMI）3 (2）。抗D的有效性通常超过疫苗制剂，例如麻疹 - 腮腺炎 - 风疹或白喉 - 破伤风毒素 - Pertussis疫苗（3, 4）。还使用一些疫苗观察到抑制性AMI效果;例如，疫苗接种婴儿的AB反应可以通过在妊娠期间穿过胎盘的母体疫苗特异性IgG AB来衰减调节（5）。虽然罕见，与初始疫苗接种后的响应相比，可以在重新发生时观察到下AB响应（6），因为在初始AG挑战后存在一段时间，在此期间随后的提升可能导致免疫应答差（7）;这被认为是由于预先存在于重新引入的Ag的IgG结合，介导AMIS效果。
体液免疫反应涉及一系列导致AB生产的事件（8）。 Ag的摄取，呈递和先天APC，特别是树突细胞的成熟（9），导致AG特异性T细胞的招生，激活和克隆扩增。同时，AG的B细胞活化发生并导致Ag内化，然后是B细胞Ag处理和Ag激活的B细胞的重新定位到T / B边界（8）。引发效应子细胞和具有加工Ag的Ag活化的B细胞之间的相互作用随后是B细胞活化途径的支化：B细胞的一个子集经历克隆膨胀并分化成短寿命的AB分泌细胞（ASC） ，而另一个子集开始涉及克隆膨胀，体细胞增强和基于亲和效果的发芽中心反应，导致长寿命的血浆细胞和记忆B细胞的分化（8, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16）。与正常情况下的这些事件相比（见图1⇓, 盒子1-7 ），在Amis条件下，血清IgM和IgG ABS（17），以及AG特定ASC（18, 19）减少（见图1⇓, 盒子6. 和 7 ）。
图1。
AMIS和对RBCS的体液免疫反应。在正常条件下，B细胞接合Ag（例如，RBC）并被激活（box 2），然后他们迁移到T细胞区域（box 1），然后是B细胞-T细胞相互作用。这些事件导致突出的B细胞的出现，该B细胞在数量中扩展（box 3）和区分进入ASC（box 7）或生发中心（GC）B细胞（box 4），产生IgM和IgG（ 盒子6. 和 7）分别以及内存B细胞（box 5）。以前已知的AMIS缺陷被描绘 盒子6. 和 7，虽然已经观察到正常的免疫功能 box 1。本研究测试了对灌注B细胞的外观的作用影响（box 3 ）。
在AMI的小鼠模型中，显然将T细胞对SRBC进行映射，然后转入IgG opsonizedSRBC至小鼠（17, 18, 19），表明在Amis条件下可能发生足够的Ag处理和呈递T细胞（参见图1⇑, box 1）。暴露于IgG-OpsonizedSRBC的APC在体外并将其输送到受体小鼠中也可以介导增强的AB反应（17），再次表明对先天APC缺乏可测量的抑制IgG效应。
这些结果共同提出，AMIS改变可能在ASC分化的上游发生（见图1⇑, 盒子6. 和 7）可能上游发芽的发芽（见图1⇑, box 4）。 Ag-Primed B细胞的外观（参见图1 ⇑, box 3）是发芽中心形成，同种型类切换，体细胞增强和ASC的分化的事件（见图1⇑, 盒子4-7 ），在MHC II类限制的B-T细胞相互作用的下游（见图1⇑, box 2）。我们使用标准模型调查了AMIs对外来RBCS对外来RBC的影响，其中用IgG将小鼠与SRBC转染了小鼠对小鼠的影响（20, 21, 22, 23）。因为难以直接检测低频Ag特异性T细胞和B细胞，所以我们使用B细胞AG的体外模型呈现给T细胞以评估B细胞灌注的程度（参见图1⇑, box 3）在正常的VS条件下（24, 25）。在Amis条件下，在免疫的小鼠中显着降低了引入的B细胞的外观。
材料和方法
小鼠和试剂
C57BL / 6小鼠（女性，6至8周龄）购自杰克逊实验室。 SRBC在Alseviers溶液中提供（Colorado血清）。在使用前在PBS（pH7.22）中洗涤SRBC三次。使用蛋白质G-琼脂糖柱色谱法（Pierce）从针对SRBC的小鼠的小鼠血清纯化IgG抗SRBC。 CON A和LPS购自Sigma-Aldrich。 ABS用于流式细胞术：FITC-缀合的抗小鼠CD3（CALTAG实验室），FITC-缀合的抗小鼠CD4（CALTAG实验室），PE缀合的抗小鼠CD19（1d3; BD Biosciences），PE缀合的抗小鼠CD8α（LY-2）（53-6.7; BD Biosciences），PERCP缀合的抗小鼠CD45R / B220（RA3-6B2; BD BIOSCIENCE），FITC-CONCULATED F（AB'）2 山羊抗小鼠IGGFCγ-Chain-Chable（杰克逊免疫研究实验室），和PE-CONCULATED GOAT F（AB'）2 抗小鼠IGM（Caltag实验室）。
免疫
小鼠挑战I.v. 10.7 在PBS（pH7.22）中洗涤SRBC或107 在37℃下用10μg的IgG抗SRBC预孵育1小时，无需进一步洗涤，并注射SRBC和IgG（19 ）。
检测SRBC特定AB响应
检测来自小鼠血清，SRBC的抗SRBC IgM和IgG的存在（5×107将PBS中的/ ml）与来自适当小鼠的血清（1/100稀释）孵育在22℃下，洗涤，并重新悬浮在8μg/ ml fitc-Congugated Goat F（Ab'）中2 抗小鼠IgG或2μg/ mL PE缀合的山羊F（AB'）2 抗小鼠IgM。使用FACSCAN流式细胞仪（BD Biosciences）获得SRBC。
细胞纯化
为了制备B细胞耗尽的脾细胞，通过根据制造商的方向使用Dynabeads小鼠Pan B（B220）细胞试剂盒（Dynal Biotec）或CD19微珠（Miltenyi Biotec）通过阳性选择策略除去B细胞。简而言之，使用ACK缓冲液（氯化铵/钾裂解缓冲液：0.15m氯化铵，0.1mM碳酸钠，1.0mM碳酸钾（pH7.22）），首先耗尽脾细胞，并重新悬浮于9×106/ ml在含有1％BSA的PBS中的PBS用于B220+ 细胞耗尽或108/ ml在PBS中的细胞，0.5％BSA，2mM EDTA用于CD19+ 细胞耗尽。然后将脾细胞在4℃下用B220 Dynabeads或15分钟孵育30分钟，CD19微珠15分钟。磁性除去细胞结合B220 Dynabeads。对于CD19.+ 细胞耗尽，首先洗涤细胞，最高可达108 将细胞重悬于500μLPBS，0.5％BSA，2mM EDTA中，并加入到LS柱（Miltenyi Biotec）中并置于MACS分离器（Miltenyi Biotec）中。收集柱洗涤三次并收集流出物（即，耗尽细胞）。洗涤B细胞耗尽的脾细胞并重新悬浮于完全RPMI 1640（CRPMI; RPMI 1640培养基，其补充有10％热灭活Fcs，80μg/ ml链霉素硫酸盐，0.2μg/ ml两性霉素B，80 U / ml青霉素G，和1.6毫米 l - 谷物）在使用前。为了确认B细胞耗尽，用抗CD16 / 32（2.4g 2）孵育脾细胞15分钟，然后用FITC-缀合的抗小鼠CD3（7μg/ mL）和PE缀合的抗小鼠CD19 （3μg/ ml）或PERCP缀合的抗小鼠B220（6μg/ mL），在22℃下在PBS中洗涤一次，重悬于500μl的PBS，由FACSCAN流式细胞仪获得，并使用CellQuest软件进行分析（数据未显示）。
根据制造商的方向，通过使用T细胞或B细胞负选择试剂盒通过磁分离通过磁性分离的磁性分离来制备纯化的T细胞或B细胞群。简而言之，在10中制备单个细胞悬浮液8 CA中有核细胞/ mL2+ - 和mg. 2+ - 含有2％热灭活Fcs和5％正常大鼠血清的免疫PBS。然后用T细胞负选择混合物（含有Abs至CD11b，CD19，CD45R，CD49b和119）或B细胞负选择混合物（含有Abs至CD4，CD8，CD11b，CD8，CD11b ，LY-6G（GR-1），CD43，CD49B，CD16 / 32和TER 119），其次是生物素选择混合物和磁性纳米颗粒。为了测试T和B细胞的纯度，用抗CD16 / 32（2.4g 2）温育15分钟，然后用FITC-缀合的抗小鼠CD3（7μg/ mL）和PE-CONGUINGED抗 - 使CD19（3μg/ ml），在22℃下在PBS中洗涤一次，重悬于500μLPBS，并通过流式细胞术分析（数据未显示）。
增殖试验
脾细胞（5×106/ ml）或脾细胞耗尽b细胞（2.5×106/ ml）用5×10培养6/ ml SRBC在200μLCRPMI中的96孔平底板中。还用Con A（1μg/ mL）或LPS（10μg/ mL）培养脾细胞。此外，脾细胞耗尽B细胞（2.5×106/ ml）用B细胞培养（2.5×106/ ml）和srbcs（5×106/ ml）。纯化的T细胞（2.5×106/ ml）与B细胞共培养（2.5×106/ ml）和srbc（5×106/ ml）。将所有细胞在37°C和5％CO中在96孔平底板中培养。2 4天。用1μCi脉冲培养的细胞[3H]胸苷（MP生物医学）收获前18-24小时，[3使用液体闪烁计数器测量H]胸苷掺入。
CFSE标签
CFSE（Invitrogen的分子探针分裂）溶解在5mM DMSO中，并加入到含有0.1％BSA的PBS中的脾细胞中，终浓度为0.25μm。在CFSE中在37℃下将细胞孵育10分钟，然后加入冰冷的CRPMI并在冰上进一步孵育5分钟。然后将脾细胞在CRPMI中洗涤三次并培养（5×106/ ml）在200μlCRPMI中具有96孔平底板中的1：1的SRBC比率。 4天后，将细胞重新悬浮在2×107/ ml在含有0.1％BSA的PBS中，用抗CD16 / 32（2.4g 2）孵育15分钟，然后用FITC缀合的抗小鼠CD4（1.4μg/ ml）浸渍30分钟，PE-缀合的抗小鼠CD8α（2.8μg/ ml）和PERCP缀合的抗小鼠CD45R / B220（6μg/ mL），在22℃下在PBS中洗涤一次，并重悬于含有0.1％BSA的500μlPBS中。通过FACSCAN流式细胞仪获得细胞和使用CellQuest软件分析的数据。未经刺激的培养的CFSE标记的细胞用于确定非分裂细胞的位置。分析CD4的增殖+ or CD8+ cells, CD4+ or CD8+ 分别分析细胞以降低CFSE荧光。分析B细胞增殖，CD4+ 和 CD8+ 从所获得的事件中排除细胞，并在B220上静止剩余的淋巴细胞群 + cells.
统计分析
使用学生分析数据 t 测试，Mann-Whitney + Dunns或单向ANOVA + Bonferroni测试如上所述。意义程度设定为 p < 0.05.
结果
IgG下调小鼠的抗RBC反应
为了验证使用用抗RBC IgG的RBC抑制对外RBCS对外RBC的反应，用抗SRBC IgG（AMI）用SRBC或SRBC转染小鼠。 SRBC的输血成小鼠诱导对抗SRBCS的AB响应（SRBC，图2⇓）。相反，Opson化SRBC的输血诱导显着降低AB响应（SRBC VS AMI， p < 0.001, Fig. 2⇓）。这种效果特异于SRBC，因为对HRBC的反应没有受损（数据未显示）。
图2。
IgG防止AB对体内SRBC的反应。将小鼠未经处理的（幼稚），与SRBC转染，或用IgG抗SRBC和SRBC（Amis）。 5天后，通过流式细胞术分析SRBC特异性IgM的血清进行小鼠。这 x-axis表示治疗组;这 y-axis表示平均荧光强度（MFI）。数据表示平均值±SEM; n = 64只小鼠/组。 ***， p <0.001 SRBC VS AMIS（ANOVA + Bonferroni）。
Amis损害B细胞灌注
在体内，与AG相互作用之后的重要早期事件涉及B细胞的引发，即随后的AB反应（24, 25）。已成功用SRBC在体内成功映射的B细胞能够随后在体外将新鲜的SRBC呈现给SRBC特异性T细胞。为了测试来自SRBC-VS AMIS处理的小鼠的B细胞是否灌注，我们将分离的B细胞与新鲜的SRBC加上SRBC特异性T细胞一起温育并测量得到的细胞增殖。源自SRBCS的小鼠的B细胞引发了使用来自SRBC-灌注小鼠的T细胞的显着T细胞响应（图3⇓B）。相反，来自Amis治疗小鼠的B细胞不能刺激SRBC特异性T细胞应答（SRBC VS Amis， p < 0.01, Fig. 3⇓B）。对照培养没有响应（图3⇓, A 和 B和未显示的数据）。因此，amis似乎抑制了丙烯官能团特异性B细胞的外观。
图3。
在输注IgG opsonized的RBC后B细胞灌注的下调。将小鼠未经处理过的（幼稚），与SRBC（SRBC）转染，或用IgG抗SRBC和SRBC（Amis）。 5天后，来自天真的T细胞（A）或SRBC-灌注小鼠（B（如图所示，用来自幼稚，SrbC免疫或Amis处理的小鼠的B细胞与B细胞一起参加。没有添加SRBC的孔中没有检测到响应（未显示）。 B细胞耗尽的脾细胞来自幼稚（C）或第5天SRBC-灌注小鼠（D还通过SRBC或来自Naive（Naive-B），SrBC-Primed（SrBC-B）或Amis处理（Amis-B）小鼠的SRBCS + B细胞一起温育。如所示，将SRBC添加为AG。细胞增殖通过[3H]胸苷掺入。这 x-axis代表治疗组（A 和 B）或体外培养条件（C 和 D ）; 这 y-axis表示CPM。数据表示平均值±SEM; n = 8 (A ）， n = 11 (B ）， n = 3 (C 和 D来自11的小鼠/数据点（A 和 B ）或3（ C 和 D）独立实验。 **， p < 0.01; ∗∗∗, p <0.001 srbc vs amis Anova + Bonferroni（A），Mann-Whitney + Dunns（ B-D. ）。
为了确认AMIS条件损害B细胞灌注及其通过SRBC特异性T细胞驱动增殖的能力，将来自SRBC底漆的VS Amis小鼠的B细胞从SRBC-Immunation小鼠中加回B细胞耗尽的脾细胞。来自SRBC-Primed小鼠的B细胞，但不是来自amis小鼠的小鼠，刺激了细胞增殖反应的增加（图3⇑D），确认来自Amis小鼠的B细胞缺乏Ag-Primed B细胞。
Primed B细胞是脾散装培养中T细胞依赖性反应的主要APC
脾脏是诱导免疫应答对I.V的主要次级淋巴机器官。转入srbcs（26）。虽然已经观察到B细胞是使用来自Ag-Primed小鼠的细胞的主要APC（24, 25），其他APC也可能有助于体外SRBC特异性T细胞增殖反应。为了更具体地解决B细胞的作用与刺激SRBC特异性T细胞的先天APC，在体外用SRBCS培养来自SRBC底碱基小鼠的脾细胞VS B细胞耗尽的脾细胞。当使用来自SRBC引发小鼠的细胞时，清楚地检测到对体外对SRBC的脾细胞增殖反应（图4⇓, A 和 B, 第2栏 ）。当使用B细胞耗尽的脾细胞时，该响应通过〜80％衰减（图4⇓, A 和 B, 第4栏 vs. 第2栏 ）。在B220耗尽后观察到B细胞耗尽的脾细胞的减少响应+ (Fig. 4⇓A ）或CD19 + cells (Fig. 4⇓B）。这表明B细胞是主要的，但不是唯一的APC在脾散装培养。如预期的那样，衍生自幼稚小鼠的脾细胞群未能响应于体外SRBC（数据未显示）。
图4。
对体外增殖的反应是大部分B细胞依赖性。如图2所示处理小鼠。2⇑。 5天后，脾脏细胞（未分压脾细胞）或脾细胞耗尽B220+ cells (A ）或CD19 + (B）（B细胞耗尽的脾细胞）与SRBC底碱基小鼠一起与培养基（NIL）或SRBC（SRBC）一起温育。分析细胞通过[3H]胸苷掺入。这 x-axis表示治疗组和体外添加的细胞类型;这 y-axis表示[3h]胸苷放射性在CPM中测量。数据表示平均值±SEM; n 来自三个独立实验的6只小鼠/数据点。
Amis在脾散装文化中损害了B细胞灌注
由于上述数据表明，在上述条件下，先天APC功能可以有助于小但重要的T细胞响应，我们使用本体培养物进一步测试SRBC特异性增殖性反应，其中这些其他APC在其天然丰富的水平处存在。在正常或氨基条件下用SRBC免疫的小鼠中除去脾细胞，并在体外用SRBCS重新接受。相对于来自SRBC攻击小鼠的反应（SRBC VS AMI，）的抗脾细胞来自AMIS小鼠的脾细胞的增殖反应显着降低了（SRBC VS AMI， p < 0.001, Fig. 5⇓A），证实用纯化细胞制备的观察结果也具有未分叉的细胞。 B细胞和T细胞能够在这些条件下响应CON A和LPS，表明全球B和T细胞群体本身和驱动CON响应所需的APC功能（27, 28, 29）存在（图5⇓B ）。
图5。
来自Amis小鼠的脾细胞不会在体外反应SRBC。如图2所示处理小鼠。2⇑。 5天后，从小鼠中分离脾细胞并用SRBC培养（A）或CON A和LPS（B）。分析细胞通过[3H]胸苷掺入。这 x-axis表示治疗组;这 y-axis表示[3h]胸苷放射性在CPM中测量。数据表示为平均值±SEM; n = 40 (A ）， n = 3 (B）小鼠/小组。 ***， p <0.001 SRBC VS AMIS（ANOVA + Bonferroni）。
为了确定酸蛋白小鼠的淋巴细胞子集，其在体外响应SRBC而增殖，我们用CFSE标记脾细胞并分析CD4的增殖+ T cells, CD8+ T cells, and B220+ B细胞在存在和不存在SRBC中。通过细胞分裂上的CFSE荧光减少评估SRBC诱导的这些细胞的增殖（图6⇓A ）（ 30）。 CD4的增殖性反应+ 来自Amis小鼠的T细胞和B细胞显着降低（SRBC VS Amis， p < 0.05, Fig. 6⇓, B 和 D）。 CD8的扩散减少+ T cells (Fig. 6⇓, A 和 C）没有统计学意义（p = 0.20）。正如预期的那样，来自幼稚小鼠的T细胞和B细胞未在体外响应SRBC（图6⇓, 广告 ）。
图6。
流式细胞术的T和B细胞增殖分析。如图2所示处理小鼠。2⇑。用体外用SRBCS刺激的CFSE标记的脾细胞用PE-缀合的大鼠抗小鼠CD4，PERP-缀合的大鼠抗小鼠CD45R / B220和PE-缀合的大鼠抗小鼠CD8α染色，并通过流式细胞术分析。 A，显示衍生自天真，SrBC或Amis处理的小鼠的细胞的点图，并在体外与SRBCs温育。基于与培养基孵育的幼稚细胞获得的点图设置标记。 CFSE荧光的降低表明细胞增殖（即，比较细胞 左上方 vs. 右上 象限）。 B220的点图+ 已经驻留了细胞以排除所有CD4+ 和 CD8+ 细胞。显示代表数据。条形图表示增殖CD4的百分比+ (B ）， CD8+ (C）或B220+ (D） 细胞。这 x-axis表示治疗组;这 y-axis表示划分CD4的百分比+, CD8+和B220+ 细胞。数据表示平均值±SEM; n 来自四个独立实验的4只小鼠/数据点。 *， p <0.05 SRBC VS AMIS（ANOVA + Bonferroni）。
讨论
通过CoDmitic IgG的共同分析，可以有效地防止对抗RBC以及其他颗粒AGS的AB反应（23, 31, 32）。这种现象也已用疫苗观察到（5）。众所周知，用IgG-Opsonized细胞AGS免疫免疫有效降低AB反应（23）。然而，在这些条件下对B细胞生理学的知识不足。该研究代表了第一看IgG-Opsonized RBC在这些早期阶段对B细胞引发的影响。
从AMIS小鼠向SRBC引发的T细胞中B细胞B细胞的能力显着降低。因为B细胞的APC功能取决于成功的引发（24, 25），B细胞灌注可能缺乏，下调或以其他方式在Amis条件下改变。我们和其他人观察到在AMI诱导后早期点免疫接种不会导致抑制，而是产生二级AB反应（19, 33, 34）。这种二次样响应，优先级，不包括B细胞厌氧，B细胞克隆缺失，或B细胞克隆沉默，或者可能在体外观察到缺乏AG特异性B细胞APC功能的机制。
与B细胞对B细胞的影响相反，AMI对T细胞引发没有显着影响，如先前由Kappler等人报道。 （18）以及我们自己（17）。有趣的是，虽然不知道CD8+ T细胞对RBC的免疫应答有作用，我们观察到CD4+ 和 CD8+ T细胞在体外响应SRBC而增殖。最近已经表明，IgG可以抑制对T细胞无关2 AGS的AB反应，例如NP-Ficoll，进一步表明，本身的T细胞破坏不是在这些条件下的作用效应的机制（35 ）。
虽然之前未在T细胞水平上检测到AMIS效果（17, 18），我们观察到CD4的特异性特异性增殖反应减少+ T cells and B220+ 在B细胞是优选的APC的条件下，来自Amis小鼠的散装卷曲细胞培养物中的B细胞。我们还没有检测到AMIS B细胞对由其他先天APC刺激的SRBC的T细胞响应的抑制作用。因此，它看起来降低了Ag-Primed CD4的增殖性反应+ T细胞可能是由于在根据Amis条件下免疫的小鼠缺乏引入的B细胞。这种缺乏“适当”的灌注B细胞对显影AB反应具有重要意义，因为这种反应可以重视依赖于B细胞募集T细胞帮助的能力。
来自Amis小鼠的缺乏灌注的B细胞对CD8具有较少的显着作用+ T细胞增殖;如果其他APC将SRBCS AGS呈现给CD8，则可能会发生这种情况+ T细胞。或者，CD4+ T细胞可以间接促进CD8的反应+ T cells to SRBCs (36），由于对CD4的B细胞效应，这种效果可能会降低+ T cells.
与可溶性AGS相比，有或没有佐剂，对颗粒AGS的B细胞反应，例如RBC，可能涉及AG接触和AG获取的不同方法。两个响应共同是BCR诱导的信号传导。然而，在颗粒状AGS的情况下，BCR诱导的信号传导之后是B细胞扩散到颗粒状Ag表面上（37, 38, 39, 40, 41）。 BCR介导的AG内化被认为促进AG加工和组装MHC-肽复合物（38, 39）。还显示出可以在受体 - 配体相互作用后直接获得膜AG，可能导致膜贴剂掺入B细胞中（42, 43）。应该发生AG处理和呈现给T细胞。在可溶性AGS的情况下，辅助细胞（如树突细胞）（44, 45）或巨噬细胞（46），可以在其细胞表面上阵列AGS，促进B细胞灌注;颗粒AGS可能不需要（40, 41 ）。
在Amis条件下，减少的B细胞灌注可能是由任何这些过程中断引起的。可以推测与颗粒状Ag的表面结合的IgG可以限制BCR识别的AG的数量，并通过B细胞预防随后的Ag获取。为了支持这一点，有几项研究表明，IgG有时可以防止B细胞呈现特异性表位对T细胞（47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54 ）。
IgG-Opsonized的RBC也可以通过在B细胞表面上的抑制性FcγRIIB交联BCR，并限制在AG表面上的B细胞扩展。但是，Amis可以独立于FCγRIIB（19）。此外，在FCγRIIB缺陷小鼠（未示出的数据）中也观察到减少的B细胞灌注，不包括FCγRIIB介导的B细胞抑制是减少B细胞灌注的机理的可能性。
AMIS效果被认为利于新生儿预防溶血性疾病中的抗D效应（1）。在全球努力取代多克隆反D与单克隆反D ABS的努力取得了有限的成功;虽然一些MAB阻止了对D AG的AB的反应，但是其他MAB增加了D-AG响应者的发病率（55）。用于评估和选择MAB的大多数测定基于这些ABS介导RBC间隙的能力（55）。本研究表明，成功的AMIS AB可以预防B细胞灌注;因此可以用于帮助促进单克隆抗D设计的额外测试可以包括在单克隆抗D管理或测试中，检测MAB的能力以防止早期B细胞对体外AGS的反应。
总之，数据表明，B细胞灌注可能在不存在，下调或以其他方式在Amis条件下改变。降低的B细胞灌注可以反映损害的B细胞活化，包括B细胞AG呈递给T细胞的损伤，这对于募集T细胞有助于发生体液免疫应答。
致谢
我们感谢J. W. Semple博士为对稿件，DRS进行严重审查。 G. Denomme和S. Song，以及S. Ma，N.Wragg，S. Pang和L.张为援助和讨论，以及圣迈克尔的研究Vivarium工作人员。
披露
作者没有财务利益冲突。
脚注
- 已收到 2008年3月6日。
- 公认 2008年5月9日。
- 版权© 2008 by The 美国免疫学家协会
